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產(chǎn)品詳情
簡單介紹：
詳情介紹：
技術(shù)原理與核心組件
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?Cre-loxP系統(tǒng)?
- ?作用機制?：由噬菌體P1衍生的重組酶系統(tǒng)，Cre酶可特異性識別34bp的loxP位點，介導兩個loxP位點間的DNA片段刪除、反轉(zhuǎn)或易位?。
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?關(guān)鍵設(shè)計?：
- ?Flox小鼠?：目標基因外顯子兩側(cè)插入loxP位點（需避免頭個外顯子，防止啟動子破壞）?。
- ?Cre工具鼠?：攜帶組織特異性（如Alb-Cre用于肝臟）或誘導型（如CreERT2通過他莫昔芬激活）啟動子?。
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?時空特異性調(diào)控?
- ?組織限制?：通過選擇特定Cre工具鼠（如Nestin-Cre靶向神經(jīng)元）實現(xiàn)器官/細胞類型特異性敲除?。
- ?時間控制?：誘導型系統(tǒng)（如CreERT2）允許在發(fā)育后期或疾病特定階段激活敲除?。
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?小鼠繁育策略?
- ?F0-F2代?：嵌合體小鼠與野生型交配獲得Flox純合子（flox/flox）?。
- ?F3-F4代?：Flox小鼠與Cre工具鼠交配，*終獲得cKO純合子（flox/flox, Cre）?。
- ?周期?：傳統(tǒng)ES打靶需7-12個月，CRISPR-Cas9可縮短至6-9個月?
