智啟醫(yī)學(xué)新維度
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產(chǎn)品詳情
簡單介紹：
詳情介紹：
1. 模型定義與構(gòu)建策略?
cPM（Cardiac-specific Pathological Model）小鼠模型通過心臟特異性啟動子驅(qū)動目標(biāo)基因的表達(dá)或敲除，模擬人類心臟疾病。主要構(gòu)建策略包括：
- ?啟動子選擇?：常用αMHC（Myh6）或cTnT（Tnnt2）啟動子，前者在成年心肌細(xì)胞特異性表達(dá)，后者在胚胎期和成年期均高表達(dá)?。
- ?基因操作方式?：包括過表達(dá)模型（連接心臟啟動子與目標(biāo)基因）、條件性敲除（cKO，需結(jié)合Cre-loxP系統(tǒng)）和條件性激活（如Tet-on/off系統(tǒng)）?。
?2. 技術(shù)流程與驗證?
- ?載體構(gòu)建?：克隆心臟啟動子片段（如αMHC 5.5 kb），插入目標(biāo)基因或sgRNA（用于CRISPR編輯），并添加報告基因（如GFP）?。
-
?品系生成?：
- 轉(zhuǎn)基因小鼠：顯微注射載體至受精卵原核。
- 基因敲除/敲入：通過CRISPR-Cas9或ES細(xì)胞打靶。
- 條件性模型：需先獲得floxed小鼠，再與心臟特異性Cre小鼠交配?。
- ?驗證方法?：基因型鑒定（PCR/測序）、表達(dá)驗證（qRT-PCR/Western blot）、功能評估（超聲心動圖、組織病理學(xué)）?
