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大鼠髓核細(xì)胞的原代培養(yǎng)總結(jié)會
日期：2025-10-21 22:49
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摘要：上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海長江軟件園，公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺，能夠為廣大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。?我們擁有專業(yè)的實驗室、先進(jìn)的實驗設(shè)備和經(jīng)驗豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊包括研究員（博士后）2人，助理研究員（博士）4人，核心研究員（碩士）15人，致力于動物模型、動物實驗、動物實驗外包、整體實驗外包，細(xì)胞實驗、細(xì)胞實驗外包、整體畢業(yè)課題等等。
2024年4月18日，周四，公司組織，由實驗室主管劉博主導(dǎo)，實驗室全體成員參與，對大鼠髓核細(xì)胞的原代培養(yǎng)的相關(guān)知識點(diǎn)，進(jìn)行了培訓(xùn)與交流。本次會議，主要針對小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞的種植模型，劉博就實驗方法深入進(jìn)行了講解，實驗室人員展開激烈的討論。以下為討論內(nèi)容的總結(jié)：
1.脫臼法處死SD大鼠，剃毛，75%酒精浸泡5min。
2.從尾椎處剪開皮膚，取出腰椎。用含2%雙抗的PBS沖洗3-5次。
3.分離椎節(jié)，切開纖維環(huán)分離凝膠狀髓核，將凝膠狀髓核置于PBS中沖洗3次，去除血跡，剪碎髓核組織呈1mm3大小，移至離心管后加入5倍體積的1.5%Ⅱ型膠原酶，37℃搖床消化2h。
4.消化結(jié)束，20%FBS終止消化，100um濾網(wǎng)過濾，1000r/min離心5min，棄上清后DMEM/F12重懸，按1×105/ml接種于培養(yǎng)板，加入含1%雙抗和 15% FBS 的 DMEM/F12，置于37 ℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
5.4d后換液，以后每3天換液 1 次，細(xì)胞達(dá) 90% 融合后傳代。
本次會議，提升公司對小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞的種植模型的重要知識點(diǎn)的認(rèn)知，針對相關(guān)實驗，更好的把控實驗質(zhì)量，提高了公司在這方面的經(jīng)驗積累。
